Tinción negativa

Objetivo

Realizar una tinción negativa para comparar con los demás tipos de tinciones que ya hemos visto previamente y describir algunas ventajas que conlleva esta tinción.

Hipótesis
Si realizamos un tinción negativa entonces se resaltarían los microorganismos y serán mas claros de ver sin tener dificultades de confundir se en el campo visual del microscopio.

Introducción

Tinciones negativas

Tinción negativa es una técnica de microscopía que permite contrastar las muestras mediante una sustancia opaca a los fotones (microscopía óptica) o a los electrones (microscopía electrónica). En el primer caso, se emplea nigrosina o tinta china; para el caso de bacterias que esporulan, esta técnica permite visualizar las esporas como entes refringentes sobre un campo de fondo oscuro. En caso de microscopía electrónica de transmisión, se emplean sustancias de alto número atómico que, por tanto, resultan opacas a los electrones transmitidos. Típicamente, estas sustancias son acetato de uranilo, citrato de plomo omolibdato de amonio. Al electrónico, esta técnica permite visualizar virus, flagelos, bacterias y otros entes de escaso tamaño.

No son una verdadera tinción. Se llaman así porque lo que realmente se tiñe es el fondo sobre el que están los microorganismos apareciendo los microorganismos sin teñir. Se emplea para ver la cápsula de S. pneumoniae y Cryptococcus neoformans en LCR.

Material

• Microscopio
• Muestra de levaduras
• Colorante eosina o negrosina
• Portaobjetos
• Gotero
• Vaso de precipitados

Desarrollo Experimental

 El primer paso es hacer una mezcla 1:1 de lavaduras-colorante. Luego, se debe tomar una gota y adicionarla en un extremo del portaobjetos y se realiza un frotis, se debe de dejar secar la muestra para posteriormente observarla al microscopio.

Resultados

Las fotos dejan ver una gran cantidad de levaduras agrupadas y uno que otro coco aislado, se ven todos como si fueran estrellas en medio de la noche.

Conclusiones

Nuestra opinión de este proceso de tinción es que es el más sencillo de todos los que hicimos, nos pareció además peculiar pues resaltaban muy bien las levaduras pues ahora resaltaba más cuando el fondo era el tincionado.  

Elaborado por: Hernández Dominguez Alfredo y Valverde Hernández Salvador Saúl

Grupo: 606        P7 "Ezequiel A. Chavéz"